可见分光光度计相关产品介绍及主要特点 光度计工作原理

【导读】技术参数 1.波长范围: 200-1000nm 波长重复性:0.5nm 2.波长精度±1.0nm 光度精度±0.5%T 3.光谱带宽2nm 波长显示:LCD2×20bit;精确至0.1nm

技术参数

1.波长范围: 200-1000nm 波长重复性:0.5nm 2.波长精度±1.0nm 光度精度±0.5%T 3.光谱带宽2nm 波长显示:LCD2×20bit;精确至0.1nm 4.杂散光≤0.2%T 220nm340nm处 5.稳定性 ±0.002A/小时 500nm 主要特点 1.采用低杂散光，高分辨率的单光束单色器，保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。 2.自动调0%T和100%T，自动调波长及多种方法的数据处理功能。 3.高分辨率，宽大的样品槽，可容纳100mm光径吸收池和相应的反射附件。 4.仪器配有标准的RS-232双向通讯接口，可外接打印机，打印相应的实验数据。 5.个性化的外形设计、轻触式按键使操作更为方便。

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微量分光光度计的试验方法及应用如何？

微量分光光度计能够快速准确的定量检测核酸、蛋白质等溶液。具有使用方便、消耗样品少(仅2μl)、不用预热、能迅速清理残留样品、不需要比色皿或其它样品定位装置、样品不需要稀释等特点，常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量，目前已成为众多实验室的常规仪器。

工作试验方法

超微量分光光度计进行浓度测定的试验方法是根据朗伯-比尔（Lamber-Beer）定律，A＝K·C·L 式中，A为吸光度；K为吸（消）光系数；C为溶液的浓度；L为液层厚度。此公式说明在入射光一定时，溶液的吸光度与溶液的浓度及液层厚度成正比。此式就是光的吸收定律的数学表达式，又叫朗伯-比尔定律。

核酸定量

核酸的定量是超微量分光光度计使用频率*大的功能。可以定量测定溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA以及RNA含量。这是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键，具有紫外吸收的特性，*大的吸收波长在260nm，吸收波谷在230nm。

除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。

蛋白质直接定量

这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说，速度快，操作简单；但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；另外敏感度低，要求蛋白的浓度较高。

比色法蛋白质定量

蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分氨基酸（如酪氨酸，丝氨酸）与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。

比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。

与传统分光光度计相比，超微量分光光度计要求的样品体积小，不需要比色皿，比色杯清洗方便，只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可。除此之外，实验过程也更为简单，不需预热，可随时检测，检测结果显示吸光度值的同时，程序直接给出浓度值。超微量分光光度计与传统相比，体积更小，更方便使用。

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荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。

基本结构和试验方法，光源与检测器成直角方式安排。

1.光源

为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm范围内强度几乎相等，故较常用。

2．激发单色器

置于光源和样品室之间的为激发单色器或*单色器，筛选出特定的激发光谱。

3．发射单色器

置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。

4．检测器

一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。

5．样品室

通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。丈量液体时，光源与检测器成直角安排；丈量固体时，光源与检测器成锐角安排。