如何选购分光光度计 光度计工作原理

如何选购分光光度计

由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，所以无论是从款式上还是价格上五花八门，一般往往给初购者造成眼花缭乱、令人无所适从的感觉；（一）、选择可满足使用者长期分析要求的仪器即可尽管分光光度计种类繁多，但不外乎简易型、中档型和型三大类；（1）简易型仪器及其特点结构这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。测量模式多为定点（固定波长）吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。适应范围小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高，。价格相对低廉，一般在2万元人民币以下，所以还有一定的市场。（2）中档型仪器及其特点结构此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为重要，zui佳的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。测量模式透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。适应范围此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。价格3～10万人民币之间，此类型仪器占分光光度计的比例大。（3）型仪器及特点除了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。测量模式透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可；适应范围科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品，也可测固态样品。价格10万人民币以上。（二）合适的性/价比无论选择上述哪一类的产品，只要仪器类型选定下来，就要在同类型仪器的产品范围中依据价格来选购，当然、同类仪器中，谁的价格便宜便买谁的；这里也要注意有时价格相差一些不一定就要买便宜的，还要全面评估；这需要多了解、多看书、多比较、多向有经验者请教；千万不要仅听信tui销人员的一面之词。（三）优良的售后服务“没有了优良的售后服务，仪器厂家便没有了生命”这是一句箴言，道理在此就不多讲了。

荧光分光光度计基本结构和试验方法 　　荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。

　　由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。

　　基本结构和试验方法，光源与检测器成直角方式安排。

　　1.光源

　　为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm范围内强度几乎相等，故较常用。

　　2．激发单色器

　　置于光源和样品室之间的为激发单色器或*单色器，筛选出特定的激发光谱。

　　3．发射单色器

　　置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。

　　4．检测器

　　一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。

　　5．样品室

　　通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。丈量液体时，光源与检测器成直角安排；丈量固体时，光源与检测器成锐角安排。

标签: 荧光分光光度计 荧光分光光度计 荧光分光光度计基本结构和试验方法_荧光分光光度计 　　紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。　　色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池，紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度，将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计；按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计；按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。　　仪器电源接通后，光源不亮。　　原因　　①光源灯泡已损坏。　　②保险管烧坏。　　处理方法　　①更换氘灯或钨灯。　　②更换保险管。　　紫外可见分光光度计噪音较大。　　原因　　光源灯泡使用时间超过寿命期。　　处理方法　　更换光源灯泡。　　自检时提示波长自检出错。　　原因　　自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子。　　处理方法　　关上仪器样品室盖子，重新自检。　　仪器自检时提示通讯错误。　　原因　　仪器与电脑之间的数据线没有连接好。　　处理方法　　连接好数据线，重新打开仪器和软件，重新自检。　　仪器零点飘忽不定，主要反映在简易仪器上。　　原因　　在简易仪器中，零点往往是通过电位器来调整，这种电位器一般是炭膜电阻制作的，使用久了往往造成接触不良。　　处理方法　　更换电位器。　　在使用过程中，出现数字显示不能归零，同时伴有图线记录基线位置偏高。　　原因　　①光电倍增等老化，性能降低。　　②信号处理板可能发生故障。　　③前置放大版出现故障，引起反馈量增大　　处理方法　　①开机通电，先做记录故障曲线，再与原始记录的标准曲线对照，找出异同点，并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管，再开机实验，结果记录出来的图线并没有什么变化，由此证明光电倍增管没有老化变质。　　②进一步检查信号处理板，未发现信号处理板各元器件损坏，对影响灵敏度有关的电位器检测，结果测得数据正常，这说明信号处理板没有故障。　　测试过程中提示能量太低。　　原因　　①光源灯泡使用时间超过寿命期。　　②样池中有不透光的东西挡住了光。　　处理方法　　①更换光源灯。　　②拿走挡光的物品。　　吸光值结果出现负值（常见）。　　原因　　没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液。　　处理方法　　做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液。　　当仪器波长固定在某个波长下时，吸光值信号上下摆动，特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。　　原因　　开关触点因长期氧化所致造成接触不良。　　处理方法　　用金属活化剂清洗按键触点即可。　　样品信号重现性不良　　原因　　排除紫外可见分光光度计本身的原因外，大的可能是样品溶液不均匀所致，在简易的单光束仪器中，样品池架一般为推拉式的，有时重复推拉不在同一个位置上。　　处理方法　　①采取正确的试样配置手段。　　②修理推拉式样品架的定位碰珠。